转基因

勿忘心安啊

将Bt基因转入烟草，从载体的选择到外源基因的表达，列出你用的步骤！！！大神们帮帮忙，急求

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lala6002

克隆Bt基因，酶切连接p1301质粒载体，1301带GUS基因可用于鉴定，热激法转入大肠杆菌表达载体，抗生素筛选，阳性克隆提质粒酶切鉴定，鉴定好的质粒转入农杆菌，抗生素筛选，阳性克隆菌夜PCR进一步鉴定，鉴定好的阳性克隆在加抗生素的YEB中摇一级菌两天左右，取一级菌夜加抗生素摇二级菌，OD值到0.6左右侵染烟草叶片8分钟，培养基中垫滤纸共培养3天，清洗后转入筛选培养基，一个月可得到阳性小芽，切下转入分化培养基，小苗生根后可炼苗移栽，最后提DNA鉴定阳性植株，也可做 GUS染色鉴定。

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asuka2015

请明天晚上10-11点来论坛下载附件。答案在附件里。

勿忘心安啊

asuka2015 发表于 2014-12-24 23:15
请明天晚上10-11点来论坛下载附件。答案在附件里。

3q●﹏●

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asuka2015

此题难度很大，但是你只要学会了方法，这题的分数的获取仅仅是在考场上动笔写完答案的体力劳动而已；或者说，看完附件，你应该希望考试能考这类试题，因为没有看过此题答案的人肯定会被此题绊倒，但是懂了的人，这一类实验设计的题的分数就是放在桌上的新年贺礼！

asuka2015

1.英语作文一定要动笔写，最后一小时英语作文都可能突破。
2.重要的专业课的知识点，一定要亲自动笔去写。不要怕费时间，这样效率更高。

勿忘心安啊

asuka2015 发表于 2014-12-24 23:45
1.英语作文一定要动笔写，最后一小时英语作文都可能突破。
2.重要的专业课的知识点，一定要亲自动笔去写。 ...

嗯啊。谢谢贴心学姐

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勿忘心安啊

asuka2015 发表于 2014-12-24 23:37
此题难度很大，但是你只要学会了方法，这题的分数的获取仅仅是在考场上动笔写完答案的体力劳动而已；或者说 ...

还想问一下，题目问我，如何将一个基因转入大肠杆菌？
我是回答一整套克隆技术，还是就回答转化感受态细胞的那一步？

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勿忘心安啊

asuka2015 发表于 2014-12-24 23:15
请明天晚上10-11点来论坛下载附件。答案在附件里。

Merry Chrismas ！！今天在太平洋东边的你不是孤单的@_@

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asuka2015

勿忘心安啊 发表于 2014-12-25 06:57
还想问一下，题目问我，如何将一个基因转入大肠杆菌？
我是回答一整套克隆技术，还是就回答转化感受态细 ...

回答克隆基因、、导入载体和感受态进入细菌。