生化实验

夜空繁昕

名无123 发表于 2014-12-14 22:30
机械破碎，超声波破碎可以吧！

嗯，可以

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名无123

夜空繁昕 发表于 2014-12-14 22:31
嗯，可以

好像还有渗透压法吧！

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892304156

夜空繁昕 发表于 2014-12-14 22:31
你跟我考一样的？你要那几年的啊？我也不太全

嗯，我也考细胞，，，你那有13年的细胞和近四年的生化吗？

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名无123

你的第六题解题方法是啥？可以教我一下嘛

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asuka2015

楼主的第三题的解答
（1）破碎细菌菌体，用超声波、高压匀浆、溶菌酶粉碎细菌菌体。
（2）蛋白质的等电点是5.0 ，缓冲溶液的pH是7.5，所以要用阴离子交换树脂。原理是：对于一直等电点的蛋白质，如果选用阴离子交换剂，那么缓冲溶液的pH应该高于该蛋白质的等电点，因为此时的蛋白质在缓冲溶液中携带净负电荷，可与用阴离子交换试剂结合。如果选用阳离子交换试剂，缓冲溶液的pH应该低于该蛋白质的等电点，因为此时蛋白质在该缓冲溶液中携带净正电荷，可与阳离子交换试剂结合。
（3）检测蛋白质的纯度方法很多。用各种光谱方法：红外、紫外、圆二色光谱与标准品的对应数据加以比对，数据越吻合当然纯度就越高。然后用SDS PAGE电泳和分子筛层析检测被提纯的蛋白质的相对分子量，同时看用SDS PAGE电泳的电泳带和分子筛层析谱峰是否符合标准品蛋白质的对应数据，如果蛋白质有多个亚基组成，那么用SDS PAGE电泳测定的是各个亚基的条带。无论是带和谱峰，窄而密（峰高），而且没有多余的电泳带和多余的谱峰，则是蛋白质纯度高。
（4）提高蛋白质浓度的方法很简单。把水溶剂的体积减少就行了，分子筛层析只会扩大溶液体积。把从分子筛层析分离的蛋白质和从SDS PAGE电泳胶中回收的蛋白质的溶液用超滤离心管在低温下超滤林心，即可以增加浓度；用中性盐盐析后过滤出蛋白质；用聚乙二醇沉淀后过滤出蛋白质；用硫酸铵沉淀后过滤出蛋白质。其实做实验时费这些事情干嘛，直接用超低温冻干机冻干成为蛋白质干粉在溶解即可，要什么浓度自己调，使用超低温冻干机冻干蛋白质的前提是该蛋白质不能是灵敏性蛋白质。

asuka2015

夜空繁昕 发表于 2014-12-14 23:32
近四年好像都是回忆版那个样子，不全，有点，解词很少，填空压根都没有，后面大题也不全！细胞一三年的都 ...

生物化学、分子生物学、细胞生物学、微生物学最后冲刺建议

1.如果用王镜岩 主编，生物化学，高等教育出版社，2002，第三版为考试指导教材，则最后冲刺，请看：
张守兵，生物化学（第三版）简答题（2007）.pdf
http://bbs.kaoyan.com/t5602059p1
这是很简明扼要但是全面的复习提纲，不过其中的分子生物学实验技术如果教材没有写，就不用看了。

2.要了解计算题和分析题的话，请看：
31道生物化学与分子生物学、细胞生物学和微生物学考研考博试题解答.pdf
http://bbs.kaoyan.com/t5602059p1

3.要在最后阶段了解生物学近年热点，就把近十年的诺贝尔生理学或医学奖获奖成果和与近十年的生命科学有关的诺贝尔化学奖获奖成果的内容的新闻网页看一下，不用看原始论文。
另外再加上表观遗传学、核糖体开关和组蛋白密码。

4.最后阶段的细胞生物学和分子生物学的实验技术冲刺，把翟中和、王喜忠、丁明孝 主编，细胞生物学，高等教育出版社，2012年，第四版，第三章好好看看，不求理解，只求记住哪些实验技术能够干什么。

夜空繁昕

名无123 发表于 2014-12-14 22:34
你的第六题解题方法是啥？可以教我一下嘛

其实就是乳糖操纵子嘛，，

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asuka2015

夜空繁昕 发表于 2014-12-14 23:32
近四年好像都是回忆版那个样子，不全，有点，解词很少，填空压根都没有，后面大题也不全！细胞一三年的都 ...

生物化学与分子生物学最后冲刺建议：
1.张守兵，生物化学（第三版）简答题（2007）.pdf
http://bbs.kaoyan.com/t5602059p1
这份材料对于生物化学最后冲刺很有价值，其中的实验技术内容，如果课本没有就不用看了。
2.分析型题目，看：31道生物化学与分子生物学、细胞生物学和微生物学考研考博试题解答.pdf.pdf
http://bbs.kaoyan.com/t5602059p1
3.看一下近几年的诺奖情况，新闻网页就行。加上组蛋白密码，表观遗传和核糖体开关。

夜空繁昕

asuka2015 发表于 2014-12-14 23:43
生物化学与分子生物学最后冲刺建议：
1.张守兵，生物化学（第三版）简答题（2007）.pdf
http://bbs.kaoya ...

学姐真好！

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江哥v587

夜空繁昕 发表于 2014-12-14 23:40
其实就是乳糖操纵子嘛，，

问题是让你设计实验证明，有办法分辨葡萄糖和乳糖的浓度变化吗，还是其他的方法，总得表现出来啊

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