【真题】浙江大学2001-2003生化真题

哥是杯具帝

浙江大学2001年攻读硕士学位研究生入学考试题<生物化学>
注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效
一 是非题1/30
1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构
2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解
3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键
4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADP
H
5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强
6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸
7 脯氨酸是α螺旋破坏者
8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键
9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链
10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中
11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的
12 酶影响其催化反应的平衡
13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关
14 维生素E是一种天然的抗氧化剂
15 维生素B1的辅酶形式是TPP
16 ATP是体内能量的储存形式
17 糖酵解过程无需氧气的参与
18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性
19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例
20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用
21 DNA复制时,后滞链需多个引物
22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件
23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应
24 Sanger曾两获诺贝尔奖
25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点
26 生长激素释放抑制因子是一个14肽
27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应
28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别
29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种
30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务
二 写出下列物质的分子结构式1/6
1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5 尼克酰胺 6 丙酮酸
三 名词解释4/24
1 反密码子 2 操纵基因 3 多肽核酸( peptide nucleic acid )
4 折叠酶 5 共价调节 6 Humen Genome Project
四 综合题10/40
1 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要
求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP?
2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异
同
3 请对中心法则加以阐述
4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离
蛋白质的实验操作步骤

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浙江大学2002年攻读硕士学位研究生入学考试题
考试科目:生物化学,编号570
注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效
一 是非题1/20
1 所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基
2在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应
速度
3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助.
4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸
酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸.
5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.
6 在某些生物中,RNA也可以是遗传信息的基本携带者
7 生长激素释放抑制因子是一个14肽
8 维生素B1的辅酶形式是TPP
9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种
10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用
11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的
12 CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程
13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸
14 即使在饥饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时会
利用酮体作为燃料分子供能
15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,如鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以
尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外
16 紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从
低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有
17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作用
18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外
19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚细胞器都能
对蛋白质进行糖基化修饰
20 真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA
二 用化学结构式完成下列酶促反应4/20
1异柠檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶
4 烯脂酰辅酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶
三 综合题10/60
1 什么是蛋白质的二级结构?稳定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸
对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成?
2 电泳是分离生物大分子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定
蛋白质的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁
移率与其分子量有什么关系?
3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分析之.
如果希望反应初速度达到其最大速度的90%,底物浓度应为多大?
4 何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔解温度(Tm)?其大小与哪些因
素有关?
5从结构和功能两大方面比较E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶
6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的
新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.

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浙江大学2003年攻读硕士学位研究生入学考试题<生物化学>
注意:答题必须写在答题纸上,写在试卷或草稿纸上均无效
一 是非题1/20
1 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于与相偶联的磷酸化作用.( )
2 酶的化学本质是蛋白质.( )
3 多肽链结构中,一个氨基酸残基就是一个肽单位.( )
4 FMN和FAD的组成中有核黄素.( )
5 在细菌的复制中起主要作用的是DNA聚合酶I( )
6 DNA变性后其粘度增大( )
7乙醛酸循环在所有的高等植物中都存在.( )
8 EMP途径本身只产生还原剂,而不产生高能中间产物.( )
9酶促反应的能量效应是降低反应的活化能.( )
10 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.( )
11 CoQ只能作为电子传递的中间载体.( )
12 DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键( )
13 组成蛋白质的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子属于不对称碳原子,因此都具有旋
光性.( )
14 mRNA的3`端polyA结构是由DNA的非编码区转录的.( )
15 糖酵解的限速酶为丙酮酸激酶.( )
16 乙酰辅酶A是进入TCA循环还是生成酮体,主要由草酰乙酸浓度调控.( )
17 E.coli RNA 聚合酶的 σ亚基与转录的终止识别有关.( )
18 氧化还原电对中,电子从电势较低的电对流向电势较高的电对,这是自由能降低的现象
.( )
19 葡萄糖和果糖都具有还原性.( )
20 如果加入足够量的底物,即使有竞争性抑制剂存在,酶催化的最大反应速度Vmax是可以
达到的( )
二 写出下列物质的结构式2/10
1 Ser 2 U 3 草酰乙酸 4 ATP 5 D-glucose
三 写出下列酶催化的生化反应式( 不要求写结构式)3/30
1 磷酸果糖激酶 2 磷酸甘油变位酶 3 丙酮酸脱氢酶系 4 顺乌头酸酶
5 异柠檬酸裂解酶 6 脂酰辅酶A脱氢酶 7 谷丙转氨酶 8 鸟氨酸转氨甲酰酶
9 DNA合成酶 10 氨酰tRNA合成酶
四 综合题15/90
1 简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理,你使用该技术分离和检测过何种物质?主要操
作步骤有哪些?
2 质粒是基因工程中最常用的载体,为获得某质粒(如pUC18)DNA,请你设计一个简单的实
验过程(步骤).
3 谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展.
4 DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物
学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?
5 何谓变性,那些因素可以引起蛋白质的变性?何谓别构(变构)?举一例说明.
6 试述三羧酸循环是如何沟通糖类,脂类和蛋白质三大有机物的代谢的串9

哥是杯具帝

二、        解析
1、简述SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得基本原理，你使用该技术分离和检测过何种物质？主要操作步骤有哪些？ 字串8
该题是实验操作中的常考题
SDS-PAGE：当SDS与蛋白质结合后，蛋白质分子即带有大量的负电荷，从而掩盖了天然蛋白质分子间的电荷差别。与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散，形状趋向一致，所以各种SDS -蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异，只反映了分子量的差异，即纯利用分子筛效应，按蛋白质分子量大小进行分离，分子量越大移动越慢。 字串3
      应用
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以用于未知蛋白分子量的测定，在同一凝胶上对一系列已知分子量的标准蛋白及未知蛋白进行电泳，测定各个的标准蛋白的电泳距离（或迁移率），并对各自分子量的对数（log Mr）作图，即得到标准曲线。测定未知蛋白质的电泳距离（或迁移率），通过标准曲线就可以求出未知蛋白的分子量。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测，纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带，但如果蛋白质是由不同的亚基组成的，它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度，一般只需要不到微克量级的蛋白质，而且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况，这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可用于单链DNA、寡核苷酸片断以及蛋白质亚基，膜蛋白、肽类等物质的分析，还可以用于研究大分子的折叠结构等方面。
      基本操作
字串5
SDS-PAGE 的基本操作和聚丙烯酰胺凝胶电泳相近，其支持介质都是聚丙烯酰胺凝胶，因此在制胶、加样和电泳仪器都都相同或相近，区别的是SDS-PAGE需要有标准蛋白溶液及供试品溶液的制备，样品预先需要用SDS处理。一般采用取标准蛋白，加水制成每1ml中含2~5mg的溶液，与水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸钠0.04g，溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中过夜。供试品照上述方法配制。此外，在电泳结束以后，需要对相对迁移率和分子量进行计算 将电泳脱色后的区带用卡尺或用扫描定位法测量染料移动的距离、染色前胶条长度、蛋白移动距离和脱色后的胶条长度。
2、质粒是基因工程中最常用得载体，为获得某种质粒(如pUC18)DNA，请你设计一个简单得实验过程(步骤)。
大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法）
此方法适用于小量质粒DNA的提取提取的质粒DNA可直接用于酶切PCR扩增。 字串2
1.      取1.5ml细菌培养物于EP管中，4000rpm离心1分钟，弃上清液，使细菌沉淀尽量干燥；
2.      将细菌沉淀重悬于用冰预冷的100 µl溶液I (50 mmol/L葡萄糖，10 mmol/L EDTA pH 8.0，25 mmol/L Tris-HCl pH 8.0) 中，剧烈振荡； 字串4
3.      加入200 µl新配制的溶液II(0.2 mol/L NaOH，1%SDS（m/v）)，盖紧EP管口，快速颠倒离心管5次，以混合混合物，确保离心管的整个内表面与溶液II接触，不要涡旋，置于冰浴中；
4.      加入150 µl预冷溶液III(每100 ml 的溶液III中含60 ml 5 mol/L 乙酸钾，11.5 ml冰乙酸，28.5 ml H2O)，盖紧EP管口，反复颠倒数次，使溶液III在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上3~5分钟；
5.      在最大转速下离心5min，取上清液于另一新EP管； 字串7
6.      用两倍体积的乙醇室温沉淀双链DNA，振荡混合于室温放置2分钟，最大转速离心5分钟；
7.      小心吸去上清液，将离心管倒置于滤纸上，以使所有液体都流出，在将附于管壁的液滴除尽； 字串2
8.      加1ml 70%乙醇洗涤沉淀，振荡混合，用12,000g离心2分钟，弃上清，将开口的EP管置于室温使乙醇挥发，直至EP管中内没有可见的液体存在（5~10分钟），用适量的ddH2O溶解；
9.      用0.5µl的RNase 37℃温育5~10分钟； 字串6
10.  电泳鉴定。
3、谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展。
自己发挥，比如：蛋白质结构与功能，RNA领域（RNA干扰），酶工程，分子病和遗传病的研究等等。 字串3
没有再出过，相当于送分题
4、DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的？请简述其基本内容。为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑，具有划时代的贡献？ 字串3
DNA的双螺旋结构模型是在1953年由Watson和Crick两个人提出的。 字串8
按Watson-Crick模型，DNA的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10对碱基组成；碱基按A=T，G≡C配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。 字串9
    DNA双螺旋结构的提出开始, 标志着生物科学的发展进入了分子生物学阶段.分子生物学使生物大分子的研究进入一个新的阶段,使遗传的研究深入到分子层次,"生命之谜"被打开,人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径.在以后的近50年里,分子遗传学,分子免疫学,细胞生物学等新学科如雨后春笋般出现,一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明,DNA重组技术更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景.在人类最终全面揭开生命奥秘的进程中,化学已经并将更进一步地为之提供理论指导和技术支持.
该题太小，以后不大会再出 字串2
5、何谓变性？哪些因素可以引起蛋白质的变性？何谓别构(变构)？举一例说明之。
蛋白质受到某些物理或化学因素作用时，引起生物活性的丧失，溶解度的降低以及其它性质的改变，这种现象称为蛋白质的变性作用。变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而造成天然构象的解体，但未涉及共价键的断裂。有些变性是可逆的，有些变性是不可逆的。 字串9
引起蛋白质的变性的因素有：热、紫外线照射、高压和表面张力等物理因素，及有机溶剂、脲、胍、酸、碱等化学因素。 字串2
别构效应（allosteric effect）某种不直接涉及蛋白质活性的物质，结合于蛋白质活性部位以外的其他部位（别构部位），引起蛋白质分子的构象变化，而导致蛋白质活性改变的现象。可分为同促效应和异促效应两类。以氧与血红蛋白的结合为例。
该题出现多次，应引起重视。 字串7
6、试述三羧酸循环是如何沟通糖类、脂类、以及蛋白质三大有机物的代谢的？ 字串2
一方面，TCA是糖、脂肪、氨基酸等彻底氧化分解的共同末端途径，另一方面，循环中生成的草酰乙酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是合成糖、氨基酸、脂肪酸、卟啉等的原料，因而TCA将各种有机物的代谢联系起来。TCA是联系体内三大物质代谢的中心环节，为合成其它物质提供C架。 重要，会是大题中的一个知识点