求助～～～细胞题不会做

刘丹494252734 · 发表于 2014-12-25 17:01

1将某种标记的蛋白质与某种细胞器分别加入离心管后共同离心，从分离的细胞器中发现有标记物出现，试分析结果？
2在同一个细胞内,用罗丹123试剂标记线粒体和用荧光标记蛋白质，问他们的分布特点及原因？
麻烦答案详细点…谢谢

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asuka2015 · 发表于 2014-12-25 23:04

就是你用小分子荧光有机物共价结合的蛋白质的定位在哪里，荧光显微镜就会观测到哪里有荧光。不明白你问啥?

刘丹494252734 · 发表于 2014-12-26 00:05

asuka2015 发表于 2014-12-25 23:04
就是你用小分子荧光有机物共价结合的蛋白质的定位在哪里，荧光显微镜就会观测到哪里有荧光。不明白你问啥? ...

题目就这样写的，我一个字都没漏打下来的…

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asuka2015 · 发表于 2014-12-26 00:24

1.如果是小分子标记说明这种细胞器里有被标记的该蛋白质或者该蛋白质接近标记部位的那一部分，如果它被切割或者降解了的话；也可能只是氨基酸的被标记二进入该细胞器的蛋白成分，总之同位素小分子荧光有机分子标记的蛋白质即使降解也可能进入一些细胞器，不一定表示被标记的蛋白质就一定在该细胞器里，必须需要在细胞器中分离到被标记的完整蛋白质才能确证。如果想GFP之类的荧光蛋白质标记，蛋白质进入细胞器的可能性比较大。

asuka2015 · 发表于 2014-12-26 01:07

本帖最后由 asuka2015 于 2014-12-26 01:09 编辑

第二题，我现在答不出来。

asuka2015 · 发表于 2014-12-26 11:22

第2题答：
荧光染料罗丹明123（Rh123）是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。Rh123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集，并发出黄绿色荧光。Rh123用于对许多种细胞进行染色，包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性，此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。所以用罗丹明123染色出现的标记荧光的范围一般只会分布于线粒体内。用荧光标记蛋白质，会根据蛋白质是否具有特定的进入细胞器的标签（比如NLS）决定蛋白质的具体的分布区域（有期待有的荧光标签显示出来）。荧光标签都有点一定寿命。

刘丹494252734 · 发表于 2014-12-26 11:37

asuka2015 发表于 2014-12-26 11:22
第2题答：
荧光染料罗丹明123（Rh123）是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。Rh123可透过细胞膜且在 ...

谢谢……

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calorimetry · 发表于 2015-6-4 16:11

考研试题还有考的这么细节的实验操作的。。。。

calorimetry · 发表于 2015-6-4 16:11

考研试题还有考的这么细节的实验操作的。。。。

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